Clásicamente, la técnica de ensayo por inmunoabsorción ligado a enzimas (enzyme-linked immunosorbent assay –ELISA–) ha sido la más utilizada para cuantificar concentraciones de biomarcadores en el LCR. Sin embargo, al tratarse de una técnica manual, está sujeta a una variabilidad significativa, lo que dificulta la obtención de resultados uniformes a lo largo del tiempo y entre laboratorios. Dicha variabilidad se ha reducido considerablemente gracias a la implementación de plataformas de inmunoensayo automatizadas con reactivos presuministrados y listos para utilizar. Por ejemplo, las plataformas Lumipulse® (Fujirebio) y Elecsys® (Roche) mediante quimioluminiscencia clásica o electroquimioluminiscencia, respectivamente, permiten analizar de forma automatizada y simultánea los biomarcadores core de EA en el LCR: Aβ42, Aβ40, t-tau y tau fosforilada (p-tau). Se han establecido puntos de corte para estos analitos que muestran buena concordancia con la PET de amiloide, siendo la ratio Aβ42/Aβ40 el marcador más preciso de patología amiloide. Estos puntos de corte pueden utilizarse en la práctica clínica rutinaria para el diagnóstico de la EA.

Los valores en el LCR de algunos marcadores de EA pueden verse influenciados por factores preanalíticos, por lo que se han descrito unas recomendaciones de consenso internacional para estandarizar la recogida de la muestra (Tabla 2).

Sin embargo, el desarrollo de biomarcadores en plasma no ha despegado hasta hace unos años y ha sido gracias al desarrollo de tecnologías ultrasensibles como la single molecule array (SIMOA, Quanterix), que permite detectar concentraciones de proteínas en rango subfemtomolar (10−15 moles por litro).

Por otro lado, en paralelo a la evolución de los métodos inmunoquímicos, también se ha desarrollado la espectrometría de masas. Esta técnica también permite cuantificar de forma precisa, consistente y con alta sensibilidad, proteínas derivadas del cerebro en muy bajas concentraciones y ha sido un avance tecnológico relevante.

Tabla 2. Indicaciones clínicas para el uso apropiado de la punción lumbar para el estudio de biomarcadores de la enfermedad de Alzheimer (EA) en el líquido cefalorraquídeo (LCR). Tomada de: Shaw LM, et al. 2018; y Hampel H. 2022.